A ，通过AHR - 配体处理（AHR诱导的CUEGS）在结肠神经元中上调的前30个基因是根据倍数变化标准（log2转换的折叠变化= 2 <最大值）鉴定的。B ，CYP1A1 :: CRE; ROSA26EYFP记者小鼠在GFP免疫染色前五天向3MC腹膜内注射 。响应于配体激活的AHR信号传导的CYP1A1诱导有望诱导EYFP的表达 。C，D ，从结肠（C）和3MC处理的CYP1A1 :: CRE的小肠（C）和小肠（D）的免疫染色；外围蛋白（红色） ，HUC/D（蓝色）和EGFP（绿色）的Rosa26小鼠。比例尺，100μm 。数据代表三个独立的实验 。E – G ，来自Wnt1 :: CRE的结肠肌丛制剂的活钙成像； Rosa26-GCAMP6F小鼠。在对照条件下（E）或ML-133 Blocker21（10μM）（F）的存在下 ，肠神经元中的电刺激的Ca2+瞬变 。数据代表四个独立的实验 。灰度图像描绘了近端结肠肌丛的制剂，其中通过单个电脉冲（顶部面板）或电脉冲序列（1 s ，20 Hz;底部面板）刺激肠神经元 ，该脉冲电极通过位于室内延伸的室内电极上的焦点电极，该局部电极引导到视野中的Myenteric Ganglion中。左，刺激前的基线 。电刺激时 ，同一神经节的中间 ，峰值GCAMP6F荧光 。比例尺，20μm。右 ，由电刺激引起的单个肠神经元的Ca2+瞬变（由中间面板中显示的颜色编码箭头表示）。用黑色箭头标记为10 s ，将电刺激施加 。在对照条件（E）（e）或单个脉冲（TOP）（n = 457个神经元）和脉冲序列（底部）（n = 526神经元）（n = 526神经元）电视（n = 526 neurons刺激）中，比较神经元Ca2+反应（平均值±S.E.M.）的平均最大GCAMP6F荧光幅度（平均值±S.E.M.）或ML-133（f）的存在 。你好 ， 来自对照（H）的结肠和抗生素治疗的（I）小鼠与KCNJ12 RNASCOPE探针杂交的小鼠。虚线定义了肌神经节的边界 ，箭头表示表达KCNJ12的细胞 。比例尺，30μm 。数据代表两个独立的实验。J ，H和I（双面非参数Mann – Whitney U检验）中显示的RNASCOPE信号的定量（平均值±S.E.M.） 。n =来自4个对照的421个神经元和4个抗生素治疗小鼠的468个神经元 。ABX ，抗生素。K，L ，来自SPF小鼠结肠的Myenteric神经节与AHR（绿色）（k）和KCNJ12（蓝色）（l）（l）rnascope探针杂交 ，并用HUC/D进行免疫染色（数据未显示） 。虚线定义了肌神经节的边界，箭头表示表达AHR和KCNJ12的神经元 。比例尺，30μm。数据代表两个独立的实验 。M ，散点图显示了肌室神经元（F检验）中AHR（K）和KCNJ12（L）的RNASCOPE信号的正相关 。n =来自3只小鼠的1,037个神经元。n ，o，对对照（AHR+/+; rosa26eyfp）对AAV9-CAMKII-CRE矢量的注射）（n）（n）和Ahren-ko（O）小鼠AHR（RED）和EYFP（绿色）的AHREN-KO（O）小鼠进行免疫染色。请注意 ，在Ahren-Ko（O）的情况下 ，绿色和红色信号之间缺乏重叠 。数据代表了两个独立实验 。比例尺，30μm。p ，肌动物神经节中AHR+神经元的百分比（AHR+/+; ROSA26EYFP小鼠注射了AAV9-CAMKII-CRE矢量）和Ahren-Ko小鼠 。从每个生物学重复的结肠（对照n = 9 ，ahren-ko的n = 1）中获取随机图像，计算了HUC/D+神经元总群体中AHR+ HUC/D+细胞的平均百分比（平均值±S.D.）的平均百分比（平均值±S.D.） 。
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希望本篇文章《微生物群的神经元编程调节肠道生理》能对你有所帮助！
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