许多解旋酶调节重组，这是需要严格控制的基本过程。某些人类疾病解旋酶的突变会导致重组 ，基因组不稳定性和癌症增加 。为了阐明这些酶的潜在作用方式 ，在这里，我们开发了一种单分子荧光测定法 ，可以可视化DNA结合和易位大肠杆菌REP ，这是一种超家族的1 DNA旋转酶，与Saccharomyces cerevisiae srs2同源 。观察到单个REP单体使用ATP水解在3'至5'方向上在单链（SS）DNA上移动。令人惊讶的是 ，在遇到封锁时 ，例如双链DNA或链霉亲蛋白，该蛋白质突然靠近其初始位置，然后进一步的易位和快照循环 。这种重复的穿梭可能是由封锁诱导的蛋白构象变化引起的 ，从而增强了蛋白质次级DNA结合位点的DNA亲和力 ，从而导致瞬时DNA环 。还观察到重复穿梭于ssDNA上，这些ssDNA被停滞的复制叉和冈崎碎片类似物 ，以及在ssDNA上的重组蛋白RECA的细丝的延迟形成。因此 ，单个REP单体与停滞复制叉的结合会导致沿单链区域的重复穿梭，从而使DNA可能远离有毒的重组中间体 。
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希望本篇文章《DNA上运动蛋白的重复穿梭》能对你有所帮助！
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